為什么使用成像系統來記錄和分析凝膠而不是像膠片這樣的傳統方法?主要原因是成像系統將更多工具放在您的手中。例如,從凝膠成像化學發光信號時,凝膠文檔系統會給你一個更大的動態范圍為清晰的圖像,更快的曝光時間和更高的效率,與膜相比,根據瑪吉Pochyla,美G市場經理 Syngene公司。其他工具包括信號飽和指標和自動化功能,這些功能逐漸使凝膠文檔系統對于沒有成像經驗的人來說更加用戶友好。此外,凝膠成像系統提供可以使用分析軟件分析和量化的數字圖像。
但對于許多習慣使用膠片 或其他文檔方法的研究人員而言,在成像系統中優化的參數數量,以**終獲得**佳數據,如果不是一項不值得花時間的完全不可能完成的任務,可能會令人難以招架。所以很幸運的是,凝膠文檔系統不斷發展到用戶和用戶的工作中。以下是今天儀器及其功能的一些示例。
許多因素進入**終決定,將自己,也許是實驗室中的每個人,都投入到一種凝膠文檔系統中。UVP的生物成像系統產品經理Mike Capps表示,研究人員在選擇系統時要考慮的**重要的一點是它是否易于使用。他還建議先試用該儀器。“由于研究人員可能會在未來幾年內每天使用他們的成像儀,我們鼓勵潛在客戶演示一個系統,就像測試駕駛汽車一樣,直到找到適合他們的那個,”他說。“考慮成本,功能集和易用性,找到一個用戶定期使用的成像系統對于確保日復一日的**佳效果**關重要。”UVP的新型觸摸屏凝膠成像儀,GelDoc- It®TS2,旨在通過簡單高效的使用來加速工作流程。它還允許無線連接和不同格式,以便輕松保存數據。為便于使用而設計的另一種凝膠成像系統是Thermo Scientific myECL成像儀,獨立,可避免需要暗室,占地面積小。研究人員正在尋找易于使用,經濟實惠的解決方案,這些解決方案仍然提供CCD相機成像和用于采集和分析的集成軟件等先進功能,可能對Aurogene的SmartGel系統感興趣。
易用性也擴展到凝膠成像系統的分析軟件。“該軟件不應成為獲得結果的障礙,應該允許研究人員在方便他們的地方分析他們的結果,無論是在實驗室還是在他們的辦公桌上,” Bio-Rad的**產品經理Kate Smith說。實驗室分離部門。“凝膠成像用戶報告說,他們**大的挫敗感是與使用目前可用的系統相關的難度,這通常需要手動調整濾鏡,鏡頭或燈光。凝膠成像提供商的傳統反應是開發具有更多規格的系統,而不是考慮對客戶真正重要的東西,這是易用性。“
易用性的**終形式是自動化,這是許多凝膠文檔系統今天的發展方向。例如,Syngene提供了一系列更小,更緊湊的凝膠成像系統,稱為PXi。與Syngene的凝膠成像儀一起出現了設備的采集軟件GeneSys。這是為您運行自動化任務的大腦。在告訴GeneSys您正在成像哪種樣品后,GeneSys會自動為樣品設置**佳成像條件。Syngene的美G市場經理Maggie Pochyla說:“在此計劃之前,用戶需要確切知道如何對樣品進行成像 - 包括曝光時間,光照設置,濾鏡設置,相機設置 - 以獲得**佳圖像。” “即使用戶不知道什么燈,GeneSys也能消除這種需求并自動捕捉圖像,
另一個重點是凝膠成像儀如何與其軟件接口,Pochyla說。理想情況下,軟件應該有所幫助,而不是阻礙 - 這使自動化變得有價值。“圖像采集和分析軟件應該直觀且易于使用,這樣即使[用戶]沒有以前的成像經驗,他們也可以輕松操作軟件和系統,”她說。Syngene的G:BOX和PXi凝膠文檔系統包括相機的自動化和硬件控制。能夠自動化這些參數的另一個優點是可以保存它們以供將來使用。
另一個使用自動化來簡化工作流程的系統是Bio-Rad的Gel Doc EZ。它完全自動化成像過程,要求研究人員只需按一下按鈕。系統的不同托盤(固定凝膠)特定于特定應用,因此采集軟件Image Lab會根據您插入成像儀的托盤自動識別您需要的成像類型。除自動化外,Bio-Rad的Smith還指出,在擁有眾多用戶的實驗室中,靈活性和易用性尤為重要。“研究人員在決定選擇哪種系統時應考慮這一點,”她說。“Gel Doc EZ允許使用多個特定應用的托盤,包括用于成像熒光染料(如溴化乙錠)的UV托盤,ProteinSimple。該公司的AlphaImager HP系統專為熒光和比色信號而設計,可選擇擴展其化學發光檢測功能。
凝膠成像系統包含太多的部件,無法在此進行全面審查,但值得一提的不可或缺的部分是捕獲信號的攝像頭。Pochyla認為相機質量是選擇凝膠成像系統時**重要的考慮因素之一。這需要對您現在使用或將來可能使用的樣品類型進行一些預先考慮。例如,“成像化學發光樣品需要冷卻的CCD相機和寬光圈鏡頭,因此用戶在購買系統之前必須shou先考慮它們的成像應用,”Pochyla說。“鏡頭f /光圈,像素尺寸和像素陣列等相機規格都有助于成像化學發光和熒光樣品時相機的靈敏度和性能。”如果相機規格聽起來像外語,
機器人攝像機集成在DNR Bio-Imaging Systems的MF-ChemiBIS凝膠成像系統中。軟件通過電機控制攝像機,電機上下移動以代替更傳統的變焦鏡頭。據DNR稱,與帶變焦鏡頭的固定式相機相比,它的機器人相機更快,更靈敏,視野更寬闊。當從具有微弱信號的凝膠獲取數據時這是有利的,因為相機可以非??拷鼧悠芬苿?。
制造商通常會提供一系列凝膠成像系統,以服務于各種研究人員。例如,UVItec 提供其**高性能的儀器,光譜一端的Platinum HD2和FireReader系統,另一端提供**基本的UVIsave HD2系統。同樣,LI-COR 為奧德賽經典紅外成像系統創造了一個兄弟姐妹,專為西方印跡而設計。LI-COR的新型Odyssey Fc是一種經濟的凝膠記錄系統,適用于DNA和蛋白質凝膠,以及蛋白質印跡。LI-COR**產品營銷經理Jeff Harford表示,在開發Odyssey Fc時,該公司旨在保持Odyssey Classic系統的靈敏度,同時簡化系統,使傳統日常實驗室技術的工作更加輕松。LI-COR特別專注于簡化對漂亮圖像的采集。“使用傳統的成像系統,您可以在系統上設置[曝光和靈敏度等參數],然后發現波段被燒壞或飽和,”Harford說,這需要您調整參數然后重新成像。“這不僅需要時間,但它使獲得答案的過程復雜化。因此,我們的設計師團隊推出了FieldBrite XT光學設計,可提供超過6個動態范圍的日志。這意味著您現在可以在**次嘗試時獲得**的圖像,然后能夠分析獲得的數據。這為研究人員提供了一個靈活,易于使用的多功能實驗室工具,并消除了舊技術的所有猜測,從而向前邁出了一大步。“
哈福德說,即使研究人員可能以不同的方式記錄凝膠,但他們對系統都有同樣的困境。“我經常聽到的一件事是,研究人員已經厭倦了使用起來非常復雜且不斷崩潰的系統,”他說。“研究人員想要做的**后一件事就是投資一個不可靠或不易操作的系統。”
凝膠成像系統在很多方面都有所進步,但根據UVP營銷和銷售副總裁Alex Waluszko的說法,它們仍然可以更簡單,更簡單。“展望未來,我預計凝膠成像將在簡單性,效率和有效性方面繼續發展,同時保持**終用戶的負擔,”他說。不久的將來,凝膠成像者甚**可能會贏得甚**堅定的電影愛好者。
頁面頂部的圖像是Thermo Scientific的myECL成像儀。